【摘 要】
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目的 观察低剂量长波紫外线诱导培养人皮肤成纤维细胞mtDNA 4977bp缺失的情况,探讨低剂量长波紫外线诱导适应性反应的可能机制.方法 以7.2J/cm2低剂量UVA单次或多次照射
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目的 观察低剂量长波紫外线诱导培养人皮肤成纤维细胞mtDNA 4977bp缺失的情况,探讨低剂量长波紫外线诱导适应性反应的可能机制.方法 以7.2J/cm2低剂量UVA单次或多次照射的培养人皮肤成纤维细胞,光镜、电镜观察细胞形态学变化,激光共聚焦扫描显微镜观察线粒体特异性荧光染料(MitoTracker Red CMX Ros)及其还原型的荧光探针(MitoTracker Red CM-H2X Ros)染色后各组细胞内荧光强度的变化,检测不同累积剂量的低剂量UVA照射对线粒体数目的影响,实时荧光PCR定量检测不同累积剂量UVA照射后的各组细胞及正常各组细胞的总mtDNA及mtDNA 4977bp缺失.结果 单次7.2J/cm2的UVA照射对培养成纤维细胞形态学和细胞增殖均无明显影响,随累积剂量增加,可观察到培养细胞均出现轻微的增生抑制,细胞的体积变大；超微结构显示累积剂量达28.8J/cm2以上的细胞可见细胞在形态学表现出了细胞老化的一些特征性改变：细胞倍增时间延长、体积增大、细胞中颗粒增加、线粒体体积增大等.而当低剂量UVA累积照射剂量达到14.4J/cm2以上,成纤维细胞内线粒体数目、总mtDNA及4977bp缺失mtDNA的比例均出现明显增加,与相同倍增数的同类型细胞比较有显著差异(P＜0.05)并呈时间和累积剂量依赖,UVA累积剂量达115.2J/cm2时,ΔmtDNA4977/mtDNAtotal为2.16‰.结论 低剂量UVA照射可诱导培养细胞出现形态学和分子标记上出现细胞老化的特征性改变,提示细胞衰老可能也是细胞适应性反应的一种表现,是在应激条件下细胞逃避死亡的机制之一.
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