MiR-221增强IFN抗HCV作用

来源 :第四届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:LUZIBIN
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  目的:研究miR-221对HCV的调控.方法:首先采用荧光定量PCR方法对HCV病人血清和健康人群血清中miR-221进行定量分析.通过western blot的方法检测miR-221对IFN-α/JAK/STAT信号转导途径的影响,并通过Targetscan与PicTar在线数据库预测寻找miR-221的作用靶点.利用荧光素酶报告系统以及小干扰RNA干扰的方法证明miR-221与其作用靶点的相互作用和miR-221抑制HCV复制的作用途径.结果:HCV感染病人血清中检测到miR-221水平升高.在Huh-7细胞中,miR-221过表达后HCV复制减弱,而抑制miR-221表达后HCV复制则增强,在Huh-7.5.1细胞中miR-221过表达或抑制对HCV的复制却没有影响.通过western blot的方法检测miR-221对IFN-α/JAK/STAT信号转导途径的影响,过表达miR-221后,JAK1、STAT1与STAT3分子的磷酸化水平上升,inhibitor则有相反的作用.通过Targetscan与PicTar在线数据库预测没有发现JAK/STAT通过中的成员与miR-221有直接的相互作用,但发现细胞因子信号转导抑制因子SOCS家族的SOCS1、SOCS3两个分子的3,UTR存在miR-221的结合位点.检测荧光素酶活性的方法,证实了SOCS1和SOCS3是miR-221的靶标分子.结论:miR-221是通过抑制SOCS1、SOCS3的表达而促进JAK/STAT信号转导进而抑制HCV的复制.
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