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本研究根据GenBank发表的TGEV TS株全基因核苷酸序列，设计了1对用以扩增TGEV主要结构蛋白M基因的特异性引物。利用RT-PCR方法扩增TGEV HB06株M基因，并将其克隆到pMD18-T载体中，进行EcoRI和XhoI双酶切鉴定，将获得的M基因片段定向亚克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中，构建了重组原核表达质粒pGEX-6P-M，转化Rossetta(DE3)感受态细胞，用IPTG诱导重组菌株表达了融合蛋白。结果表明，从TGEV HB06株扩增得到了M基因片段，该基因全长789bp，编码262个氨基酸，与TS株、Purdue-115株、TFI株和H16株的M基因同源性分别为97％、99％，96％和97％。SDS-PAGE电泳结果显示，重组表达质粒获得了约56Kda的目的带，其中M蛋白的分子质量约为30kDa，与预期的结果一致，并且表达产物主要以包涵体的形式存在;Sestern-blot分析表明，表达的M重组蛋白可以被免源抗TGEV阳性血清识别;试验结果证明，TGEV的M基因高度保守，在大肠杆菌表达系统内成功表达了TGEVM蛋白。