【摘 要】
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烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs),是一类重要的配体门控离子通道,广泛分布于肌肉、中枢和外周神经系统中,与学习、感觉、神经紊乱等重要
【机 构】
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海南大学热带生物资源教育部重点实验室,海口市海洋药物重点实验室,海南海口570228;海南大学海洋学院,海南海口570228海南大学热带生物资源教育部重点实验室,海口市海洋药物重点实验室,海南海口57
【出 处】
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第12届生物毒素研究及医药应用学术大会
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烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs),是一类重要的配体门控离子通道,广泛分布于肌肉、中枢和外周神经系统中,与学习、感觉、神经紊乱等重要行为相关。α9α10nAChRs主要存在于外周神经系统,是许多耳部疾病,如耳鸣,听力丧失,眩晕等的潜在作用靶点,也是治疗神经痛药物的作用靶点。因此,在非洲爪蟾卵母细胞(蛙卵)上建立α9α10nAChRs模型,对以该受体为靶点进行药物筛选至关重要。α9α 10nAChRs模型建立过程和方法简述如下。首先将含有大鼠α9和α10亚基基因的质粒线性化后,通过体外转录合成两种亚基的cRNA,并按1：1的比例将两种cRNA混合均匀后,显微注射到非洲爪蟾卵母细胞中,培养3-5天后,利用双电极电压钳技术对受体的表达情况进行检测。结果显示,在钳制电压-70 mV条件下,注射了α9和α10nAChR亚基cRNA的蛙卵细胞,在10μM乙酰胆碱(Acetylcholine,ACh)刺激下产生内向电流,并且该电流可以被α9α10nAChRs的特异阻断剂αO-芋螺毒素GeXIVA所阻断,对照空白细胞不产生电流,说明α9α 10nAChRs模型构建成功,为利用该模型筛选作用于α9α10nAChRs的芋螺毒素,以及其他海洋生物活性物质提供了基础。
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