【摘 要】
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本研究首先根据产鸟氨酸的谷氨酸帮杆菌的比较蛋白质组学研究的结果，通过质粒过量表达鸟氨酸合成途径中谷氨酸上游途径有关基因，以提高内源谷氨酸的供给，发现过量表达与NADP
【出 处】
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第四届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会
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本研究首先根据产鸟氨酸的谷氨酸帮杆菌的比较蛋白质组学研究的结果，通过质粒过量表达鸟氨酸合成途径中谷氨酸上游途径有关基因，以提高内源谷氨酸的供给，发现过量表达与NADPH合成有关的基因能明显提高鸟氨酸产量。适应性进化是近年来发展起来的一种菌种改良的有效手段，它与基因敲除的代谢工程相结合可有效地构建高效的工程菌。为此，本研究以产鸟氨酸的C.glutamicum ATCC 13032(pargFpproBΔspeE)为出发菌，经过70天的传代自适应进化得到鸟氨酸产量提高了20％的C.glutamicum pAPE6937，然后敲除进化菌的argR基因得到C.glutamicum pAPE6937R42,5L罐发酵可产24.09g/L鸟氨酸，该值为目前工程菌的最高水平，同时该菌不含质粒和抗生素抗性基因，适合工业化生产。转录水平和NADPH分析表明，鸟氨酸合成途径中谷氨酸上游途径基因表达水平的上调和胞内NADPH浓度的增大导致代谢进化菌C.glutamicum pAPE6937R42能高效生产鸟氨酸。
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