【摘 要】
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生物条形码检测方法最早是在2003年由Mirkin提出,用于检测SPA.要构建一套完整的生物条形码检测体系,需要根据待测目标物来设计合适的捕获探针、识别探针、起放大作用的生物条
【机 构】
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宁夏大学化学化工学院,宁夏银川750021
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生物条形码检测方法最早是在2003年由Mirkin提出,用于检测SPA.要构建一套完整的生物条形码检测体系,需要根据待测目标物来设计合适的捕获探针、识别探针、起放大作用的生物条形码;如果要进行二次放大,还需要使用和一次放大的生物条形码互补的DNA序列.食源性致病菌感染引发的疾病是威胁人类健康的重要因素,快速、准确地鉴定食源性细菌是有效预防和控制这类疾病的前提条件.现有的方法尚且存在一些缺憾,本研究工作采用新型生物条形码检测技术,利用DNA生物条形码和纳米金联级信号放大作用检测大肠杆菌DNA,同时对传统检测方法进行改进,构建了基于DNA生物条形码的两步法检测目标DNA的新方法.本文依据Mirkin原理，对生物条形码检测技术进行改进。将与目标序列部分互补的DNA片段C修饰在金电极上;与目标链B部分序列进行互补杂交;再和修饰在纳米金颗粒上的与目标序列部分互补DNA片段T1杂交;最后再与修饰在纳米金颗粒上的与T1互补的DNA片段T2杂交，将捕获探针C滴加到金电极表面进行自组装，再利用纳米金-DNA特异性的结合，逐步滴加大肠杆菌DNA序列B、标记在纳米金颗粒上的DNA条形码T1以及T2，对待测物进行检测，将此传统二次信号放大的两步法对大肠杆菌DNA检测与四步法相比，检测到的电化学响应信号略小于四步法的二次信号放大所检测得，但是高于四步法的一次信号放大检测出的电化学信号。鉴于四步法操作时间长，操作过程越多，产生的误差也会越多，因此选用两步法检测大肠杆菌特征DNA，即解决了四步法操作中的一些缺点，也能有效的检测目标探针。
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