在斑马鱼中选择性表达光敏阳离子通道(ChR2)在体提高胶质细胞兴奋性

来源 :中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第七届全国学术会议(The 7th Biennial Meeting and the | 被引量 : 0次 | 上传用户:lgwfzc
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  胶质细胞功能的研究是近年来神经科学领域的热点之一.目前大量的在培养细胞和脑片上进行的研究表明,胶质细胞对神经系统的发育、功能和疾病的发生都起到重要的主动调节作用.在本工作中,我们将一种蓝光敏感的非选择性阳离子通道(channlerodopsin Ⅱ,ChR2)特异性地表达在斑马鱼的胶质细胞中,从而可以无创伤地选择性调节胶质细胞的活动,为在体研究胶质细胞和神经元的交互作用提供可能.ChR2是一种在单细胞蓝藻中存在的感光蛋白,其在细胞膜上形成阳离子通道.当表达ChR2的细胞受到蓝光照射时,通道开放,导致细胞去极化.由于ChR2可以反复被激活且不衰减和反应速度快(相应时间为微妙级),近两年来该技术已逐渐被认为是遥控神经系统活动的最佳手段之一.我们首先用斑马鱼GFAP基因的启动子驱动ChR2特异性地表达在斑马鱼胶质细胞中.继而运用在体穿孔膜片钳电生理方法,证明表达ChR2的细胞的膜特性与胶质细胞是一致的.蓝光照射下,表达ChR2的细胞在-60 mV处产生一个内向电流(翻转电位在0 mV左右)或去极化反应.这些结果表明,通过给予蓝光照射,我们可以特异性地提高活体斑马鱼胶质细胞的兴奋性.下面,我们将利用这种策略,在体研究胶质细胞对神经元和突触发育的调节.
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