成年小鼠心房肌细胞分离方法的改进及钾电流记录

来源 :第二十四届长城国际心脏病学会议、亚太心脏大会暨国际心血管病预防与康复会议(The 24th Great Wall Int | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhulimin520
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:建立稳定、重复性好的小鼠心房肌细胞分离技术,观察小鼠心房肌细胞形态以及钾通道电流特性,为进一步研究小鼠心房肌细胞的电生理特性打下基础.方法:在体视显微镜下行主动脉插管,应用Langendorff装置灌流,依次用无钙台氏液、酶消化液(含胶原酶Ⅱ和胰蛋白酶)灌流,灌流完后,剪除心室组织,心房组织块用消化酶液(仅含胶原酶Ⅱ)行二步消化,分离出小鼠单个心房肌细胞,采用标准的全细胞膜片钳技术记录钾电流.
其他文献
目的:运用CD147 shRNA慢病毒载体局部浸润兔颈总动脉粥样硬化斑块抑制CD147表达,降低MMP-9水平,评价斑块稳定性的变化,明确CD147过表达诱发的MMP-9水平升高可诱发斑块不稳定,基因沉默CD147是一种稳定动脉粥样硬化斑块的治疗措施.方法:运用液氮损伤动脉内膜结合高脂饲养10周建立兔颈总动脉粥样硬化模型,通过随机处死3只兔子,评价造模情况.
会议
目的:探讨不同浓度瑞舒伐他汀对兔颈动脉粥样硬化斑块内的CD147表达水平以及斑块稳定性的影响.方法:将40只新西兰大白兔随机分为五组:空白对照组、模型对照组(液氮损伤+高脂饲料建立动脉硬化模型)、低浓度药物干预组(造模后予以瑞舒伐他汀1mg/ (kg·d)干预)、中浓度药物干预组(造模后予以瑞舒伐他汀5mg/ (kg·d)干预)、高浓度药物干预组(造模后予以瑞舒伐他汀10mg/ (kg·d)干预)
会议
目的:探讨高密度脂蛋白(HDL)对氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人血小板活化的影响.方法:同时将3组等体积洗涤血小板的其中一组(HDL+ox-LDL组)加入HDL (100 μ g/mL),另外两组(ox-LDL组、PBS组)均分别加入等体积的无钙磷酸盐缓冲液(PBS),均置于37℃环境下孵育15分钟,HDL+ox-LDL组、ox-LDL组均分别加入ox-LDL (50 μ g/mL),
会议
目的:观察不同浓度瑞舒伐他汀对兔外周血单核巨噬细胞CD147及基质金属蛋白酶表达水平的影响.方法:体外密度梯度离心法分离单核细胞及佛波酯诱导分化为巨噬细胞,将其分为空白对照组、低浓度药物干预组(1.0μ mol/L)、中浓度药物干预组(5.0μ mol/L)、高浓度药物干预组(10.0μ mol/L),培养48h后,用RT-PCR法检测CD147mRNA的表October 2013 Volume
会议
目的:探讨唯BH3蛋白Bim(Bcl-2 interacting mediator of cell death)在缺氧致大鼠心肌细胞凋亡中的作用.方法:在体外原代培养出生1~3天的大鼠心肌细胞,并用抗α-横纹肌肌动蛋白免疫组化法进行鉴定.用脂质体法将Bim-siRNA瞬时转染细胞,制作缺血缺氧损伤模型(转染48h后给予缺氧12h处理).实验分组: (1)正常对照组;(2)缺氧组;(3)缺氧+阴性对
会议
目的:探讨17β-雌二醇对HUVECs过氧化损伤的保护机制.方法:用ox-LDL(终浓度100 μ g/mL)作用HUVECs建立氧化损伤模型,实验分为四组: (1)正常对照组(NOR);(2)模型组(MOD):培养基含终浓度100 μ g/mL的ox-LDL(3) 17β-雌二醇组(E2):培养基含终浓度100 μ g/mL的ox-LDL、0.01μM的E2;(4) 17β-雌二醇+雌激素受体抑
会议
目的:探讨骨髓间质干细胞(BMSCs)移植对心力衰竭大鼠心肌组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的影响及机制.方法:采用异丙肾上腺素(ISO)皮下注射的方法建立大鼠的心力衰竭模型,随机分成3组,每组8只,心肌内分别注射BMSCs(简称BMSCs组)、BMSCs条件培养液(简称BMSCs-CM 组)及生理盐水(Saline
会议
目的:探讨氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)对血小板CD147表达的影响.方法:分别以终浓度50 μ g/mL、100μ g/mL ox-LDL体外刺激洗涤血小板,以流式细胞仪检测血小板上CD147,CD62P及CD63的表达,酶联免疫吸附(ELISA)检测血小板上清液中可溶性CD147 (sCD147)含量,共聚焦显微镜、透射电子显微镜观察血小板形态改变及颗粒释放.
会议
目的:探讨氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)对原代提取的小鼠骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)凋亡的影响.方法:密度梯度离心法+贴壁培养法原代提取C57BL/6小鼠骨髓MSCs分别进行以下实验: (1)细胞生长曲线测定;(2)流式细胞术细胞表面抗原CD29、CD31、CD
会议
目的:氧化应激产生的活性氧在某些心血管疾病如缺血再灌注损伤中,扮演了重要的角色,其中线粒体氧化呼吸链是活性氧产生的重要来源.我们既往研究发现白藜芦醇在氧化应激当中起到了一定的保护作用,然而其在线粒体氧化呼吸链中的机制尚不是很明确,因此本课题旨在探讨研究: (1)白藜芦醇是否能增强细胞抗氧化应激能力,是否能调控AKT以及STAT3磷酸化;(2)白藜芦醇是否对线粒体氧化呼吸链复合物Ⅰ的功能以及亚基合成
会议