【摘 要】
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目的 验证瘢痕疙瘩成纤维细胞中存在CASK和IDl的异常表达,并观察青蒿琥酯对二者的影响.方法 (1)收集临床手术切除的瘢痕疙瘩和正常皮肤组织标本各15例,采用组织微粒贴壁法行成纤维细胞(Fb)的原代培养,取3-8代的细胞用于试验.f2)通过免疫荧光证实瘢痕疙瘩Fb中存在CASK和IDl的表达.(3)用10mg/L、30mg/L、50mg/L、80mg/L、120mg/L的青蒿琥酯作用于体外培养的
【机 构】
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400016 重庆医科大学附属第一医院烧伤整形科
【出 处】
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第十届全国烧伤救治专题研讨会暨福建省第八次烧伤外科学术研讨会
论文部分内容阅读
目的 验证瘢痕疙瘩成纤维细胞中存在CASK和IDl的异常表达,并观察青蒿琥酯对二者的影响.方法 (1)收集临床手术切除的瘢痕疙瘩和正常皮肤组织标本各15例,采用组织微粒贴壁法行成纤维细胞(Fb)的原代培养,取3-8代的细胞用于试验.f2)通过免疫荧光证实瘢痕疙瘩Fb中存在CASK和IDl的表达.(3)用10mg/L、30mg/L、50mg/L、80mg/L、120mg/L的青蒿琥酯作用于体外培养的瘢痕疙瘩Fb,通过MTT法确定药物的IC50值,取IC50值作为药物干预浓度.(4)通过青蒿琥酯干预体外培养的瘢痕疙瘩Fb后,用流式细胞术检测干预前后细胞周期和凋亡的变化.(5)以正常皮肤组为对照,通过RT-PCR、Vv％stem-blot检测正常皮肤组和瘢痕疙瘩组及青蒿琥酯干预前后瘢痕疙瘩组Fb中CASK和IDl的核酸和蛋白表达的变化.结果 (1)成功培养瘢痕疙瘩标本6例.(2)瘢痕疙瘩Fb中存在CASK和IDl的表达,CASK主要表达在胞浆和胞膜,IDl主要表达在胞浆和胞核.(3)青蒿琥酯干预后,瘢痕疙瘩组G0/G1期细胞百分比明显高于干预前,P＜0.05；G2/M期细胞百分比明显低于干预前,P＜0.05.青蒿琥酯干预后,瘢痕疙瘩组凋亡率与干预前有明显差异,P＜0.05.(4)正常情况下,正常皮肤组和瘢痕疙瘩组Fb中CASK和IDl的mRNA和蛋白表达存在差异(P＜0.05),CASK在正常皮肤组Fb中的表达高于瘢痕疙瘩Fb,IDl在瘢痕疙瘩组Fb中的表达高于正常皮肤组,青蒿琥酯干预后,瘢痕疙瘩组Fb中CASK的mRNA和蛋白表达较前上升(P＜0.05),IDl的mRNA和蛋白表达较前下降(P＜0.05).结论 CASK和IDl可能参与了瘢痕疙瘩Fb的增殖,青蒿琥酯抑制瘢痕疙瘩Fb的增殖可能与其上{周CASK和下调IDl的表达有关.
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