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目的:脑血管疾病是世界上第二位高死亡率性疾病,每年有510万人死于脑血管疾病,占总死亡人数的9.5％。我国脑血管疾病的绝对患病人数相当于发达国家的全部患病人数,其中缺血性脑血管疾病(ICVD)占80％以上。随着介入神经放射技术的迅猛发展,脑血管疾病的治疗得到了极大地提高,目前,急性脑缺血的治疗已经由单纯的药物治疗发展为神经介入和／或药物溶栓治疗,这对于及时恢复缺血组织血液循环,减少缺血造成的程度和范围,最大限度挽救“缺血半暗区”(ischemic penumbra)脑组织,无疑是最佳的早期治疗选择；但是,由于急性脑缺血再通后可以多途径地级联一系列再灌注损伤,使得动脉溶栓限制在严格的时间窗内进行,因此,临床上患者就诊时常已错过动脉溶栓的最佳时机。因此,减少脑缺血／再灌注损伤,延长动脉溶栓的治疗时间窗具有重要地临床意义。亚低温对于脑缺血／再灌注损伤的神经保护作用已经在动物实验和临床治疗中得到证实。但在亚低温的实施过程中,仍然存在耗费大量人力、物力及可能出现的并发症,如肺炎等缺点。因此,研究人员试图寻找到一种新的低温实施方式来选择性地降低局部脑组织温度。Ding首先应用亚低温结合介入动脉溶栓技术,通过中空导管向大鼠MCA梗塞区灌注冷盐水,获得了理想的脑保护作用。这对于亚低温在缺血性脑血管疾病中的应用具有极大的指导意义。使用一种全新的方法,将动脉溶栓技术和亚低温结合起来,通过血管内灌注冷盐水的方法造成颅内局部低温,观察其对脑缺血／再灌注损伤的保护作用。同时,探讨利用该方法时,灌注多少温度的盐水,使脑温降低到理想深度和达到理想的持续时间,取得最佳的脑保护作用是我们研究的目的。
方法:本研究分为4组(SD大鼠,n=90),第一组：分A1、B1、C1三亚组,制作缺血3小时／再灌注48小时大鼠模型。单纯缺血／再灌注组(A1组)：不灌注冷盐水(n=16)； 20℃冷盐水灌注组(B1组)：再灌注前灌注10分钟20℃冷盐水(n：16)；10℃冷盐水灌注组(C1组)：再灌注前灌注10分钟10℃冷盐水(n=16)。三组分别检测脑梗塞体积、神经功能缺失评分(梗塞后2小时和再灌注后48小时)、生理指标、48小时存活率及脑温和肛温。第二组：分A2、B2、C2三亚组,制作缺血3小时／再灌注24小时大鼠模型。单纯缺血／再灌注组(A2组)：不灌注冷盐水(n=8)；20~C冷盐水灌注组(B2组)：再灌注前10分钟灌注20℃冷盐水(n=8)；10℃冷盐水灌注组(C2组)：再灌注前10分钟灌注10℃冷盐水(n=8)。再灌注24小时后处死大鼠,检测脑组织含水量(干湿比)。第三组：分A3、B3、C3亚组,制作缺血3小时／再灌注48小时大鼠模型。单纯缺血／再灌注组(A3组)：不灌注冷盐水(n=3)；20℃冷盐水灌注组(B3组)：再灌注前10分钟灌注20℃冷盐水(n=3)；10℃冷盐水灌注组(C3组)：再灌注前10分钟灌注10℃冷盐水(n=3)。再灌注48小时后处死大鼠,取以大脑中和大脑前动脉为中心区的血管观察光镜和电镜下管壁的改变。第四组：10℃冷盐水灌注大鼠6只,观察其长期存活率和生存状态。各组缺血模型制作方法详见第二部分。
结果:第一组：B1组灌注20℃冷盐水后可迅速将梗塞区皮质温度由36.3±0.9℃降至34.4±0.8℃,纹状体温度由37±0.8℃降至35.1±0.8℃,持续1小时以上；C1组灌注10℃冷盐水后可将梗塞区皮质温度由36.1±0.2℃降至31.7±1.9℃,纹状体温度由36.6±0.4降至32.3±1.8℃,持续4小时以上。与A1组相比,B1组神经功能缺失评分有明显好转(达40％),脑梗塞体积(26±8％)和48小时存活率(93％)之间的差异有显著性(p=0.000)；C1组神经功能缺失评分明显好转(达73％),脑梗塞体积(12±6％)和48小时存活率(100％)之间的差异也有显著性(p=0.000)；而且,B1、C1组之间差异有显著性(p=0.000)。第二组：B2组干湿比(82±4％)、C2组干湿比(82±2％)与A2组干湿比(80±7％)相比差异无显著性(P>0.05)。第三组：B3、C3组冷盐水灌注可造成轻微的血管内皮损伤,但与A3组相比差异无显著性(p>0.05)。第四组：10℃冷盐水灌注大鼠可长期存活30天,且无明显神经功能缺失。 结论:
1.在大鼠MCAO模型建立时,应用显微镜下直视气管插管全身麻醉法明显优于水合氯醛腹腔注射麻醉法,其对脑温及其他指标影响较小。2.改良的大鼠MCAO模型可以用于研究动脉内低温脑保护治疗研究,是一种稳定性好、可重复率高的大鼠脑缺血模型。3.脑缺血再灌注期间,脑温并非恒定不变,即使在室温和湿度恒定的条件下,脑温仍有波动。缺血期脑温先下降后缓慢升高,再灌注期脑温反跳式升高后稍有下降,然后缓慢升高。4.动脉内冷盐水灌注(10℃、20℃)能诱导出缺血区亚低温,甚至低温,能明显缩小缺血后梗死体积；同时动脉内冷盐水灌注不加重脑水肿,对颅内动脉管壁没有造成不可逆的器质性损害。10℃冷盐水灌注能明显改善大鼠的长期存活。未来临床工作中,该方法可用于缺血性脑血管疾病的亚低温治疗。