屎肠球菌EF1对肠上皮细胞膜的保护作用

• 作 者: 黄怡[1]李卫芬[2]
• 机 构: 广西大学动物科学技术学院,广西南宁 530004
• 出 处: 2013广西畜牧兽医学会动物营养与饲料学分会学术年会
• 发表日期: 2013年期

屎肠球菌是一种可直接饲喂的益生菌菌种，能够调节肠道微生态平衡、防治腹泻以及提高动物的生产性能，作用与抗生素相当。本课题组从健康仔猪空肠勃膜中分离到一株屎肠球菌EF1，具有产酸能力强、耐胆盐、抑制肠道致病菌生长、促进断奶仔猪生长、改善肠道菌群结构、促进免疫球蛋白和补体产生等作用，并且安全、无毒、无致病性，是一株适用于养猪生产的优秀益生菌菌株。但是屎肠球菌EF1的作用机理尚未清楚，需要在细胞水平上进行深入的研究。
碱性磷酸酶（AKP)和乳酸脱氢酶（LDH)是正常活细胞新陈代谢的产物，它们在细胞内的活力反映了细胞的代谢状况(Hashimoto & Shimizu, 1993)，当细胞膜的完整性受损时，细胞内的AKP和LDH会大量释放到培养液中。因此，细胞培养上清中的AKP和LDH含量升高是衡量细胞膜破损的指标之一。为了阐明屎肠球菌EF1对肠上皮细胞膜的影响，本试验采用人结肠腺癌细胞系Caco-2细胞进行体外试验，通过检测细胞内和细胞外的AKP和LDH活性，观察屎肠球菌EF1对Caco-2细胞代谢活性及细胞膜完整性的影响，以及受大肠杆菌K88感染时对的Caco-2细胞的保护作用，为阐明屎肠球菌EF1的益生作用机理提供科学基础。为探讨屎肠球菌EF1对肠上皮细胞膜的影响,用Caco-2细胞进行体外试验,检测细胞与屎肠球菌EF1共孵育后培养上清和细胞裂解液中的磷性磷酸酶(AKP)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性,并通过这两项指标观察屎肠球菌EF1在大肠杆菌K88入侵时的保护作用.结果表明,屎肠球菌EF1降低细胞上清中的AKP和LDH活性(P＜0.01),并在大肠杆菌K88感染时阻碍AKP和LDH从细胞内逸出(P＜0.01).
结果提示,屎肠球菌EF1能够保护Caco-2细胞的完整性,并阻止大肠杆菌K88对细胞膜的破坏.屎肠球菌EF1增强Caco-2细胞的AKP和LDH正常代谢活性，且维持细胞膜的完整性，并减轻大肠杆菌K88对细胞代谢活性的抑制作用以及对细胞膜完整性的损伤程度。