锯缘青蟹卵黄蛋白原全长基因的克隆与分析

来源 :第十届全国水产青年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:puhongzhi
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  卵黄蛋白原(vitellogenin,VTG)是卵黄蛋白(vitellin,Vn)的前体,是卵生动物卵黄的主要成份.从锯缘青蟹(Scylla serrata)性腺EST(Expressed Sequence Tag)中鉴定出卵黄蛋白原基因,通过5RACE,3RACE和简并引物进行PCR,并利用生物信息学分析显示获得的VTG基因全长cDNA序列,序列显示分析VTG cDNA序列包括7 816 bp,包括19 bp的5 非编码区域(untranslated Region,UTR),90 bp 3非编码区(3UTR)(除去polyA)和7 680 bp开放阅读框(open reading frame,ORF),该开放阅读框编码2 560个氨基酸序列.预测其蛋白质的分子量为287.743 ku,等电点为6.62.它含有一段信号肽(M1-A17),1个酶切位点(A17-A18),2个二硫键(C168-C192,C438-C444),8个含有保守的NX(S/T)基序的N-联糖基化位点和166个位于丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的磷酸化位点.PSORTⅡ软件分析结果显示VTG可能定位于细胞核内(52.2%).通过比对后发现已获得的VTG氨基酸序列与其他己知的甲壳类卵黄蛋白原序列38% ~81%的一致性.通过PCR证实了雌蟹的卵巢和肝胰腺是卵黄蛋白原的合成部位.
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