松针红斑病病原观察及其分子检测技术

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松针红斑病为世界流行病害,危害多种针叶树种,在中国东北使樟子松受害严重,导致大面积死亡.该病害寄主范围广、适生范围大、危害严重、难以根除、易于人为传播,至今仍未得到有效控制.本研究通过对松针红斑病显微观察,提取分离病原菌的DNA,利用通用引物ITS1/ITS4进行核糖体DNA(rDNA)转录间隔区(Internal Transcribed Spaces,ITS)的PCR扩增,得到539bp的扩增产物.利用DNAMAN软件对该序列进行系统进化分析,证实本实验所获得序列其菌株与Dothistromapini同属于Mycosphaerella属.在此基础上设计松针红斑病特异性引物DPF1/DPF2,在DNA浓度仅为0.68fg/μL仍可扩增出一条约180bp的预期条带,该引物可有效特异性检测松针红斑病发病松针组织.
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