利用慢病毒表达载体干扰梅花鹿角柄骨膜细胞P21基因

• 作 者: 郭倩倩[1]王大涛[2]褚文辉[2]鲁晓萍[2]秦欣[1]赵海平[2]李春义[2]
• 机 构: 江苏科技大学,镇江 212018
• 出 处: 第七届(2016)中国鹿业发展大会
• 发表日期: 2016年期

　　利用慢病毒干扰系统，对东北梅花鹿角柄骨膜干细胞(PP细胞)P21基因进行干扰.结果表明：1)筛选出的两条针对梅花鹿P21基因的siRNA与载体质粒PLVTHM连接成功，并与pMD2.G、pCMV-dr8.9质粒共转染到293t细胞，获得重组慢病毒；2)通过感染PP细胞并利用流式细胞仪进行分选，获得了纯度90％以上的感染细胞；3)荧光定量RT-PCR检测表明P21基因的mRNA水平大幅度下调，干扰效率达到70％.表明本实验成功干扰了P21基因在PP细胞中的表达，获得了低表达P21的PP细胞系，为以后研究P21基因在鹿茸再生过程中的作用奠定了基础.