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目的:建立不同提取方法的何首乌UPLC指纹图谱,分析其成分与肝细胞毒性的相关性,初步阐明肝毒性物质基础。方法:采用正交试验设计获得不同提取方法的何首乌样品,以人肝细胞毒性作为评价指标,研究不同提取物的肝细胞毒性;建立UPLC指纹图谱,采用PLS回归将所得毒性数据与指纹图谱色谱峰相关联,寻找何首乌肝细胞毒性物质。结果:正交试验结果显示,乙醇浓度对肝细胞毒性具有显著性影响,其中50%乙醇提取物毒性最大;UPLC指纹图谱得到12个色谱峰,有6个峰对细胞毒性起主要作用,其中以大黄素影响最强。结论:通过谱-效相关研究获得了6个何首乌肝细胞毒性物质,对何首乌肝毒性物质基础研究具有一定的参考意义。