【摘 要】
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目的 我们的前期研究,采用全人类基因组芯片对中国人肢端黑素瘤组织的研究发现,趋化性细胞因子CCL18在肿瘤组织的表达明显增高.本研究利用IL-4诱导人单核细胞产生的CCL18
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所
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目的 我们的前期研究,采用全人类基因组芯片对中国人肢端黑素瘤组织的研究发现,趋化性细胞因子CCL18在肿瘤组织的表达明显增高.本研究利用IL-4诱导人单核细胞产生的CCL18、重组CCL18细胞因子与A375黑素瘤细胞株共培养,探讨其在黑素瘤生物学行为方面的作用.方法 体外实验使用密度梯度离心法成功分离人单核细胞,并使用IL-4成功诱导单核细胞,产生CCL18,与重组人CCL18细胞因子,分别与A375黑素瘤细胞株共培养,通过MTT法检测CCL18对A375增殖的影响；通过趋化试验及重组基底膜侵袭实验,测定CCL18对肿瘤细胞的趋化能力及侵袭作用；通过将A375黑素瘤细胞株接种于鸡胚尿囊膜,测定不同情况下CCL18对肿瘤血管生成的影响；使用裸鼠成瘤的模型及裸鼠成瘤组织切片经Ki-67、Bcl-2免疫组化染色及TUNEL原位凋亡染色后分析,观察CCL18细胞因子对A375黑素瘤细胞裸鼠内成瘤作用的影响.并通过免疫组化对67例黑素细胞来源的良、恶性肿瘤进行分析.结果 成功分离并诱导产生CCL18的单个核细胞,MTT法测定结果提示CCL18细胞因子对A375黑素瘤细胞的增殖作用可能不是其主要作用.IL-4诱导产生CCL18的单核细胞组及CCL18重组细胞因子组与对照组比较均对肿瘤细胞存在趋化作用,并促进肿瘤细胞的转移；IL-4诱导组及重组CCL18组在鸡胚尿囊膜试验中可促进肿瘤血管的生成作用.裸鼠成瘤的模型及免疫组化发现诱导及重组CCL18在A375黑素瘤细胞系体内试验中可促进肿瘤的增殖,抑制肿瘤细胞的凋亡.免疫组化对皮肤黑素细胞来源的良、恶性肿瘤分析显示良性痣、Spitz痣及发育不良性痣不表达CCL18,而黑素瘤表达CCL18.结论 CCL18可能与黑素瘤的进展有关,并调节肿瘤的生物学行为.但需要更多研究以明确其作用机制及功能.
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