【摘 要】
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目的：探讨TLR4信号通路在酒精对肠粘膜损伤的作用及luteolin的干预作用。方法：培养Caco-2细胞,建立完整肠粘膜屏障模型.采用MTr、Hoechst染色法选择最佳酒精刺激浓度.随后
【机 构】
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首都医科大学附属北京天坛医院消化内科 100050
【出 处】
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2012年北京医学会肠外肠内营养学分会学术年会
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目的：探讨TLR4信号通路在酒精对肠粘膜损伤的作用及luteolin的干预作用。方法：培养Caco-2细胞,建立完整肠粘膜屏障模型.采用MTr、Hoechst染色法选择最佳酒精刺激浓度.随后每次实验分为Ctrl组、EtOH组、Lut(luteolin,TBK1抑制剂)组、Lut+EtOH组.采用MTT法检测各组间酒精对细胞的毒性作用；Transwell小板检测各组间荧光素钠的透过率；免疫荧光法检测各组间细胞TLR4受体、TBK1的表达；ELISA法检测各组间TNF-α水平。结果：(1)MTT, Hoechst染色测定10%浓度的酒精为最佳刺激浓度。(2)EtOH组荧光素钠透过率较Ctrl组Lut+EtOH组明显升高，而Ctrl组与Lut组荧光素钠的透过率并无明显差异。(3) EtOH组TLR4, TBKl表达明显高于Ctrl组和Lut组，相比于EtOH组，EtOH+Lut组TLR4受体、TBKl表达减弱。(4) EtOH组TNF-a水平较Ctrl组明显升高，P<0.05，而Lut+EtOH组TNF-a水平较EtOH组有明显的降低，P<0.05。结论：慢性酒精摄人导致了肠上皮TLR4受体表达上调，通过MyD88途径(TRIF途径)非依赖的信号通路TLR4-TBKI，导致TNF-a的释放，进一步导致了肠粘膜的损伤，luteolin可有效阻断TLR4信号通路，可减轻酒精对肠粘膜的损伤。
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