【摘 要】
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目的：从百岁老人齿槽嵴萎缩的生物学机理出发,针对破骨细胞功能代谢中miRNA的参与种类与机制进行探讨.方法：来本院做齿槽嵴修整术的70-80岁的老人,排除可造成骨代谢异常的
【机 构】
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100853北京,中国人民解放军总医院
【出 处】
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中华口腔医学会老年口腔医学专业委员会第十次全国老年口腔医学学术年会
论文部分内容阅读
目的：从百岁老人齿槽嵴萎缩的生物学机理出发,针对破骨细胞功能代谢中miRNA的参与种类与机制进行探讨.方法：来本院做齿槽嵴修整术的70-80岁的老人,排除可造成骨代谢异常的系统性疾病和炎性疾病,按齿槽嵴吸收状况分为齿槽嵴不萎缩组和萎缩组(轻、中、重),采集术区的齿槽骨、血液、组织液.Trizol试剂提取总miRNA,采用LC Sciences公司的基因芯片对局部组织按分组做差异表达谱.按已经获得的差异表达谱定制探针,通过基因芯片技术按分组分析百岁老人外周血清中相关miRNA表达谱的变化情况.对具有明确上下调的miRNA体外进行转染,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色和骨吸收陷窝实验观察破骨细胞的分化成熟情况.通过qRT-PCR方法检测不同分组情况下miRNA的量化规律,绘制回归曲线,进一步验证明显变化的miRNA在破骨细胞分化过程中的表达情况.采用Target Scan生物信息学软件预测靶基因,利用荧光定量PCR及Western blot方法鉴定靶基因.构建齿槽嵴萎缩相关miRNA的沉默芯片库,研究其在外周血中的降解情况.结果：发现21个差异表达明显的miRNA,其中明确上调的miRNA有16个,下调的miRNA有2个.结论：齿槽嵴萎缩的百岁老人存在差异表达miRNA,但其相应的作用需进一步实验证实.
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