论文部分内容阅读
核酸技术作为监测和鉴定病原的第一步正在被广泛使用，PCR发展到新一代PCR产物RT-PCR，它是一种在试验进行中可以看得见的反应。在PCR作为诊断技术主流的同时，建立在核酸基础上的新一代诊断技术正在形成，如检测遗传物质的环介导扩增技术(LAMP)和基因芯片技术。
当人们对有兴趣的病原在实验室不能(不容易)分离和生长的时候，核酸鉴定技术的价值就提升了。本文描述了我们使用RT-PCR研究火鸡冠状病毒和火鸡星状病毒的情况，组织培养系统不适合这两种病毒的检测。
幸运的是：火鸡冠状病毒和传染性支气管炎病毒(IBV)一样，其基因序列已经被测定，用于测定IBV的RT-PCR被成功地应用于火鸡冠状病毒。类似的结果，哺乳动物和禽类的星状病毒在基因1上面有一些保守序列，使得能够设计潘-星状病毒的核苷酸引物。我们检测的结果表明，火鸡感染火鸡冠状病毒和火鸡星状病毒的感染率分别为52％和70％，可见这两种病毒的感染非常普遍。
在一个腹泻症状特别严重的火鸡群，其死亡率超过20％，两种病毒都被检测到，此外，也检测到了肠道致病性大肠杆菌。
环介导扩增技术(LAMP)是一项比PCR更具活力的方法，它需要便宜简单的仪器，结果用裸眼可以判定：如果病毒存在则液体改变颜色。在野外就可以使用这种方法。核酸芯片技术用单一操作可以检测数百种或数千种病原/菌株，在不知道病原(或多种病原混合感染)的情况下，这种方法特别有用，它可以确诊疫病，包括有多少种新的病原。本文中描述了我们拥有的3000个核苷酸芯片和IBV感染细胞。