【摘 要】
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CBISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)是新近出现的一种由RNA指导的Cas9核酸酶对靶向基因进行编辑的技术.最初的研究发现CRISPR/Cas9是
【机 构】
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第四军医大学实验动物中心,西安安徽医科大学第一附属医院肿瘤科,合肥
【出 处】
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第十五届中国西部实验动物管理与学术交流会
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CBISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)是新近出现的一种由RNA指导的Cas9核酸酶对靶向基因进行编辑的技术.最初的研究发现CRISPR/Cas9是细菌的免疫防御机制,细菌通过CRISPR/Cas9系统可将入侵的病毒DNA或其它外源DNA降解从而达到免疫防御的目的.CRISPR系统共分3类,其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白(Cas蛋白)共同发挥作用,而Ⅱ类只需一种Cas蛋白.之后研究者对CRISPR/Cas9系统进行深入研究,通过基因工程技术将crRNA(CRISPR-derived RNA)和tracrRNA(trans-activating RNA)进行改造,获得具有靶向作用的sgRNA(single guide RNA),在sgRNA的靶向作用下,Cas9蛋白发挥核酸酶切割活性可对目的基因进行编辑.CRISPR/Cas9技术具有操作容易,敲除效率高等特点,是目前构建基因修饰动物最方便的策略,广泛用于基因敲除小鼠研究.
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