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本文根据草鱼免疫球蛋白IgM的序列,设计草鱼IgM重链的恒定区CH1和CH2的表达引物进行PCR扩增,将扩增片段克隆至表达载体pET-16B,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达.利用组氨酸蛋白纯化树脂进行纯化表达产生重组蛋白rCH1和rCH2,并以纯化重组蛋白rCH1和rCH2作为免疫原,分别免疫BALB/c小鼠,抗体阳性的杂交瘤细胞用间接ELISA方法进行筛选.经筛选、二次亚克隆,最终恒定区CH1和CH2分别获得1株能稳定分泌抗草鱼IgM的单克隆抗体,分别命名C11,A5.