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目的 胶质母细胞瘤作为恶性胶质瘤中最常见、死亡率最高的一种,长期以来因其高侵袭性、易复发性,是治疗的难点.以肿瘤细胞系为研究对象的体外实验发现,高侵袭性肿瘤细胞系比低侵袭性细胞系更容易诱导血管生成拟态(vM)行成.从U87诱导而来的干细胞在体外三维培养下能形成网状结构,提示其在不同的微环境作用下具有较强的可塑性.因此,本实验目的以U87细胞系作为研究对象,采用共培养技术,探讨肿瘤相关巨噬细胞对U87细胞VM形成的影响.方法 采用外周血单核细胞分离和纯化,M2型巨噬细胞的诱导,流式细胞技术鉴定M2型巨噬细胞,M2型巨噬细胞与U87细胞共培养,U87细胞体外成管实验,细胞蛋白及RNA表达测定,细胞增殖试验(CCK-8),细胞转移试验等实验方法.结果 M2型巨噬细胞的形态学变化,单核/巨噬细胞从圆形变为分枝状.M2型巨噬细胞分子标记物表达变化,CD68是所有巨噬细胞的共同特异性标记物,而CD206是M2型巨噬细胞的膜特异性标记.本实验发现诱导后细胞CD68和CD206的表达均较对照组明显升高.q-PCR检测发现IL-4处理组CD68、CD163、CD204的mRNA水平也较对照组明显升高,提示IL-4诱导的巨噬细胞具有和M2型巨噬细胞相同的表型特性.另外,U87细胞和M2型巨噬细胞共培养后体外成管能力提高,而且,U87细胞共培养后增殖、侵袭、转移能力也提高.结论 本实验证明了M2型肿瘤相关巨噬细胞可以促进胶质瘤细胞血管生成拟态形成,由于采用非接触共培养体系,提示肿瘤相关巨噬细胞分泌的一种或多种细胞因子可能是促进血管生成拟态形成的关键因素.