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目的:利用重组cDNA表达文库的血清学筛选(sEREx)方法从皮肤T细胞淋巴瘤(Cutaneous T-cell lymphoma CTCL)细胞系SeAx cDNA噬菌体表达文库中筛选肿瘤抗原。
方法:CTCL细胞系SeAx mRNA建立cDNA噬菌体表达文库,重组噬菌体感染大肠杆菌,表达的重组蛋白转印到硝酸纤维素膜上,与SeAx细胞膜蛋白免疫的兔血清进行反应,加酶标的二抗,显色,阳性的克隆测定核苷酸序列,再到数据库中进行搜索比较。
结果:共筛选了1×106个噬菌体克隆,得到25个阳性克隆,经核苷酸序列测定和数据库分析,其中4个cDNA片段为膜蛋白成分,分别为Integrin alpha 4,Ligatin,Matrix metalloproteinase 24和MHC-I molecule HLA-A。
结论:用SEREX方法从CTCL细胞系SeAx mRNA建立的cDNA噬菌体表达文库中筛选到4个肿瘤细胞膜蛋白基因,它们可以引起机体产生体液免疫反应,并可能成为潜在的免疫治疗靶点。