【摘 要】
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氨肽酶属于肽酶M1家族,在蛋白质消化吸收方面发挥着重要的作用.本实验通过同源克隆和RACE技术从草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道中克隆了APN基因.该cDNA编码892个氨
【机 构】
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长沙学院生物与环境工程系,长沙,410003
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氨肽酶属于肽酶M1家族,在蛋白质消化吸收方面发挥着重要的作用.本实验通过同源克隆和RACE技术从草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道中克隆了APN基因.该cDNA编码892个氨基酸,包含一个保守的跨膜螺旋结构.系统进化分析表明,草鱼APN基因与斑马鱼的亲缘关系最近,其核苷酸同源性为81.5%.实时荧光定量PCR结果表明,APN在前肠组织中的表达量最高,其次是后肠.通过昼夜节律分析表明,APN白天的表达量高于夜间.此外,饲料蛋白水平和蛋白源的影对草鱼肠道APN的表达均具有显著影响(P<0.05),实验表明20%的饲料蛋白水平和鱼粉可以显著增加APN的表达量.其次,在饲喂不同浓度的外源性谷氨酰胺和谷氨酰胺二肽后,APN表达量在高水平谷氨酰胺及7.5g/kg谷氨酰胺二肽处理后表达量显著增高.本研究为鱼类APN基因表达调控以及改善鱼类饲料配方提供了理论基础.
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