【摘 要】
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【目的】 运用“基因加强组织工程学”原理，将 PGL3-TGFβ1 重组质粒转染兔骨髓间充质干细胞，探讨体外诱导向软骨细胞分化的可行性，为软骨损伤修复研究提供体外实验依据。【方法】 体外分离、培养新西兰大白兔 BMSc，脂质体法将 PGL3-TGFβ1 重组质粒转染 BMSc，绘制细胞生长曲线，评价转染后细胞生长活性（MTT 法），分别在转染细胞体外培养第 2、7 天，进行抗 TGF-β1 和抗Ⅱ
【机 构】
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中山大学附属第一医院,骨科,广州市中山二路58号,510080 中山大学基础医学院,分子生物医学中
【出 处】
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2005年全国骨科修复与移植技术学术研讨会暨中国医药生物技术协会骨组织库分会成立大会
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【目的】 运用“基因加强组织工程学”原理，将 PGL3-TGFβ1 重组质粒转染兔骨髓间充质干细胞，探讨体外诱导向软骨细胞分化的可行性，为软骨损伤修复研究提供体外实验依据。
【方法】 体外分离、培养新西兰大白兔 BMSc，脂质体法将 PGL3-TGFβ1 重组质粒转染 BMSc，绘制细胞生长曲线，评价转染后细胞生长活性（MTT 法），分别在转染细胞体外培养第 2、7 天，进行抗 TGF-β1 和抗Ⅱ型胶原免疫组织化学染色（SABC 法），计算机图像分析，Spss 11.0 统计。
【结果】 1. 体外培养第三代获得较单纯兔 BMSc（梯度密度离心法、贴壁筛选法）；2. PGL3-TGFβ1 转染 BMSc，转染后细胞生长活性较对照组降低，（MTT，P<0.01）；3. 转染后细胞培养第 2 天，抗 TGFβ-1 免疫组化检测可见阳性颗粒，图像分析，具有显著差异（P<0.01）；5. 转染后细胞培养 7 天，抗Ⅱ型胶原免疫组化染色，细胞内可见阳性颗粒，图像分析具有显著差异（P<0.01）；
【结论】 1.脂质体法可以将PGL3-TGFβ1 重组质粒转染骨髓间充质干细胞；2. 脂质体法转染 BMSc，对细胞活性有一定影响；3. 转染后 BMSc 表达 TGFβ1；4. 转染后 BMSc 细胞能够分泌Ⅱ型胶原，表现软骨细胞生理特性，提示向软骨细胞方向分化。
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