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针对石斑鱼病害频发这个阻碍我国渔业可持续发展的重大问题,本文以鱼类先天性免疫功能为基础,首次对斜带石斑鱼Toll样受体13 (TLR13)基因的功能特点、病原相关分子模式的识别及激活的信号通路进行了较为综合的研究.Toll样受体(Toll-like receptor, TLR)是主要的天然免疫受体,能够参与识别多种病原相关分子模式PAMPs(Pathogen-associated molecular pattern),并激活下游信号通路的级联反应,促进细胞因子的分泌,协助机体抵御病原分子的入侵.TLR 13位于胞内细胞器膜上,已发现小鼠TLR13可识别细菌及病毒RNA上的一段保守序列,并通过髓样分化因子88依赖的信号通路激活下游的免疫反应.本研究克隆得到的斜带石斑鱼TLR 13全长3559 bp,其开发阅读框共编码948个氨基酸残基.TLR13mRNA在脑、胸腺、头肾、肠道等组织中有较高的表达量,并在细菌23SrRNA片段类似物ORNSa 19刺激斜带石斑鱼脾脏细胞(grouper spleen细胞,GS细胞)后显著性表达上调.细胞免疫荧光实验研究表明,石斑鱼TLR13在293 T细胞及GS细胞中的定位模式相似,大部分与内质网共定位,部分与早期内体共定位.双荧光素酶报告基因检测发现,过表达石斑鱼TLR 13后,ORN Sa 19可以激活下游IFN-β的启动子活性.我们还研究了TLR13在一种常见鱼类致病菌——副溶血弧菌,侵袭的过程中发挥的作用.结果表明,副溶血弧菌中分离的RNA可以显著性激活TLR 13的表达,而在GS细胞中敲除TLR13后会显著性抑制副溶血弧菌RNA介导激活的细胞因子,表明TLR 13在抵御细菌入侵的过程中发挥重要的作用.此外,我们还克隆得到了斜带石斑鱼UNC93B1的全长cDNA序列并研究其表达模式及亚细胞定位,发现与TLR 13的亚细胞定位一致,判定其可参与TLR 13由早期内体到内质网的转运.采用SiRNA敲降UNC93Bl发现能够对多种病原相关分子模式诱导的细胞因子产生影响.通过上述研究,首次证实了鱼类TLR 13在识别细菌性病原体的过程中发挥重要的作用,完善了鱼类Toll样受体家族的研究,证实了在斜带石斑鱼中UNC93B1能够参与TLR 13介导的免疫调节,同时了解鱼类识别细菌类病原体的机制,为鱼类的抗病选育提供了坚实的理论依据.