骨膜去细胞生物支架制备方案优化

来源 :2015年浙江省骨科学学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:onepiece_bing
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  目的 探究制备兔胫骨骨膜去细胞生物支架的最佳方案,为后续骨膜去细胞生物支架作为支架材料应用于骨组织工程领域提供一种新的选择。方法 取健康新西兰大白兔,游离双侧胫骨近端内侧骨膜,不同方案1,2和3通过物理冻融(-80℃,24h)、金属螯合剂(EDTA-2Na)、高渗溶液(NaCl),去污剂洗脱(Triton-X100、SDS)和酶消化(DNA酶、RNA酶)等不同组合获取骨膜去细胞生物支架。通过HE染色、DAPI染色、番红O染色和基因组DNA定量分析(n=3)测定细胞结构及DNA成分残留;Masson染色和羟脯氨酸测定法(n=6)定性定量检测骨膜细胞外基质的主要成分(胶原)的保留情况;扫描电镜观察骨膜去细胞生物支架的表面微结构;皮下包埋实验(n=4)观察该支架的免疫排斥反应。
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