猪附红细胞体双抗体夹心ELISA检测方法的建立和应用

• 作 者: 薛书江;贾立军;于龙政;张守发;
• 机 构: 延边大学农学院,吉林 延吉 133002
• 出 处: 第四届人畜共患病学术研讨会、2014年中国狂犬病年会、中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会
• 发表日期: 2014年期

　　为建立方便快捷的猪附红细胞体血清学检测方法，本研究应用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单克隆抗体和兔抗猪附红细胞体多克隆抗体。然后以纯化的抗猪附红细胞体单克隆抗体为捕获抗体，纯化的兔抗猪附红细胞体多克隆抗体为检测抗体；应用方阵试验前后确定检测抗体和酶标二抗的最佳反应浓度，以及捕获抗体和标准抗原的最佳反应浓度；对酶标二抗、封闭液和底物显色液(OPD)的最佳工作时间进行优化；对30份猪附红细胞体阴性样本进行双抗体夹心ELISA检测，确定双抗体夹心ELISA方法的临界值；进行特异性试验、敏感性试验、批内重复性试验、批间重复性试验和临床应用试验，从而建立猪附红细胞体双抗体夹心ELISA检测方法。