力达霉素与其单克隆抗体3H8联用对U937细胞增殖及凋亡的影响

来源 :第十一届全国抗生素(微生物药物)学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:goskatecomcn
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  目的:3H8是本研究室应用杂交瘤单克隆抗体技术制备的抗力达霉素(lidamycin,LDM)单克隆抗体,可与力达霉素及其辅基蛋白特异性结合。通过研究LDM与其单克隆抗体3H8联用对人单核细胞性白血病U937细胞凋亡及增殖的影响,初步评价LDM和3H8抗体对治疗人单核细胞白血病的潜在应用价值。
  方法:以Fc受体阴性的人宫颈癌HeLa细胞为对照,免疫荧光细胞化学实验检测3H8与Fc受体高表达的人单核细胞性白血病U937细胞的结合。MTT法检测3H8单抗联合应用LDM对U937细胞和HeLa细胞增殖的影响,并计算IC50值及两药相互作用指数(CDI)。Annexin V-FITC/PI双染结合流式细胞仪检测法,检测3H8单抗联合应用LDM对U937和HeLa细胞凋亡的影响。
  结果:3H8单抗可特异性的与Fc受体高表达的U937细胞结合,而与Fc受体阴性的HeLa细胞不结合。单用LDM对U937细胞的IC50值为2.73×10-12M,联用3H8抗体后,力达霉素对U937细胞的IC50值为2.O1x10-13 M,降低13.6倍,计算CDI值结果表明,3H8和LDM联用对抑制U937细胞具有协同作用;二者联用对Fc受体阴性的HeLa细胞无明显增效作用。LDM联用3H8抗体后,对于诱导U937细胞凋亡率显著增加,1 nM, 0.1 nM,0.01 nM时分别增加45%、95%、84%,有显著的统计学差异,1 nM和0.1 nM时的CDI<0.85.表明LDM联合应用3H8抗体对诱导U937细胞凋亡有协同作用。LDM与3H8抗体联用对Fc受体阴性的Hela细胞诱导凋亡无增效作用。
  结论:3H8可通过其Fc段靶向性地与高表达Fc受体的单核细胞结合,而3H8的可变区能与力达霉素结合,将力达霉素带到单核细胞周围,通过受体介导的内吞作用,使力达霉素进入单核细胞,靶向性地介导LDM抗单核细胞白血病的作用。抗力达霉素的3H8抗体与力达霉素联合应用可以增强对靶细胞杀伤活性,显示应用前景。
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