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玉米大斑病是由玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)引起的重要的玉米叶部病害,在流行年份常造成巨大的经济损失.立足于分析病原菌致病性的调控机制,探讨更加有效的防治途径已成为目前研究的热点之一.在前期研究中,利用候选基因法及Genomic Walking等技术克隆得到了玉米大斑病菌StPK1基因序列,本研究在此基础上,利用DNASTAR、DNAMAN软件及NCBI网站中BLAST软件对玉米大斑病菌StPK1基因的结构进行分析,发现该基因具有蛋白激酶类基因所特有的保守结构域；我们构建了以pBS质粒为出发载体,构建了玉米大斑病菌StPK1基因敲除载体,同时,采用聚乙二醇(PEG)介导的转化方法,将该基因敲除载体转化到野生型菌株的原生质体中,经潮霉素抗性(Hgy+)筛选、PCR及RT-PCR检测得到了1株基因缺失突变体；通过比较突变菌株与野生型菌株在生长发育及致病性等方面的差异,发现StPK1基因敲除突变体的生长速度明显减慢；菌落呈灰白色,菌落中央老菌丝发生明显的白溶现象；菌丝形态不规则,颜色较浅,分隔不明显,细胞内部出现许多液泡状结构；显微观察发现,基因敲除突变体的菌丝细胞壁呈透明状,扫描电镜观察发现,菌丝表面出现明显褶皱,且突变体对细胞壁降解酶高度敏感,在细胞壁降解酶作用2.5h、3h、3.5h时原生质体的释放量均比野生型多,其中,3h时突变体中的释放量是野生型菌株的20倍；突变体对SDS、H2O2高度敏感,且其敏感性随浓度的增加而增加；突变体分生孢子的产量明显低于野生型菌株,分生孢子在48h仍不能穿透玻璃纸；致病性分析发现,突变体对刺伤和健康的玉米叶片均不能侵入,且致病性丧失.上述结果表明,玉米大斑病菌StPKI基因参与调控病菌生长发育、细胞壁形态建成、分生孢子产生、侵入过程.