【摘 要】
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为了丰富广西巴马小型猪细胞因子生物学数据,本文采取广西巴马小型猪的外周血,分离淋巴细胞,提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR扩增,将克隆出的与目的基因大小相符的片
【机 构】
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College of Animal Science and Technology, Heilongjiang August-First Land Reclamation University, Daq
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为了丰富广西巴马小型猪细胞因子生物学数据,本文采取广西巴马小型猪的外周血,分离淋巴细胞,提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR扩增,将克隆出的与目的基因大小相符的片段回收,再与T载体连接,转化到大肠杆菌DH5α中,筛选阳性克隆,将重组菌测序后提交NCBI.比较克隆序列与已知序列的同源性,并利用软件对克隆序列进行分析.结果表明,已克隆出的巴马小型猪细胞因子IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α基因序列长度分别为338bp、377bp、380bp、402bp,测序结果均与目的基因预期估计值吻合.序列分析发现与已知的家猪或野猪的相应基因同源性较高,IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α序列同源性分别为98.9％、100％、99.2％、100％.研究巴马小型猪细胞因子基因序列不仅丰富了生物学数据,而且为细胞因子的功能研究提供了依据,也为细胞因子的定量检测奠定了基础.
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