利用纳米金重力检测DNA及其酶活性的新方法

来源 :第十二届全国电分析化学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yy349764474
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恶性肿瘤一直以来严重威胁着人类健康,p53基因及其产物是各种理化因素及病毒致癌因子等最常作用的分子靶位,因此基因突变检测在生物医学研究中起着非常重要的作用.这篇文章结合纳米金的特殊性质,构建了一种检测p53基因突变及其相关酶活性的新方法.这种方法表现出较好的重现性、稳定性及灵活性.靶DNA的检测:若靶序列为与探针完全互补的部分p53基因序列,则能与金探针杂交并使之延伸,在连接酶的作用下与带荧光信号的双链DNA连接,整体上形成一个完整的有荧光信号的双链;离心后,荧光信号在沉淀中;如果靶序列存在单碱基突变或是任意序列的,则探针不能杂交、延伸,FAM标记的DNA链不能连接到纳米金颗粒上,离心后上清液中有荧光而沉淀中无。相关酶活性的研究:Taq DNA聚合酶和T4连接酶用量对反应效率有一定影响,随着酶用量的增加,延伸、连接反应效率提高,达到一定程度后,会对反应有所抑制。
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