【摘 要】
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目的：获得剧毒海洋生物毒素膝沟藻毒素1/4 (Gonyautoxin 1/4,GTX 1/4)高亲和力、强特异性的适配体.方法：通过指数富集的配基系统进化技术(Systematic Evolution of Ligands
【机 构】
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第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室
【出 处】
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第四届吴宪吴瑞国际学术研讨会、第九届全国医学生物化学与分子生物学、第六届全国临床应用生物化学与分子生物学联合学术讨论会
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目的：获得剧毒海洋生物毒素膝沟藻毒素1/4 (Gonyautoxin 1/4,GTX 1/4)高亲和力、强特异性的适配体.方法：通过指数富集的配基系统进化技术(Systematic Evolution of Ligands by EXponential enrichment,SELEX)筛选GTX 1/4适配体.用生物膜干涉技术(BLI)和等温滴定量热法(ITC)分析适配体与GTX 1/4结合的动力学参数.基于mfold软件预测适配体二级结构,截短和突变优化适配体.通过圆二色谱法(CD)分析毒素GTX1/4结合适配体时构象的变化.结果：分别利用氧化石墨烯吸附游离DNA特性和GTX 1/4化学偶联于磁珠后SELEX筛选GTX 1/4适配体,两种筛选方式所得适配体的Kd值分别在10nM和u M级.CD谱显示GTX 1/4能够诱导适配体构象发生显著的变化.截短和突变等优化,可以进一步提高适配体与GTX 1/4的亲和力.结论：氧化石墨烯SELEX筛选GTX 1/4适配体有着更高的效率,所得适配体为快速检测GTX 1/4,及其解毒研究提供了起始序列.
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