负载灭活口蹄疫病毒树突状细胞对CD+8T淋巴细胞的旁位活化效应

• 作 者: 李杰;李潭清;石玮;边海霞;王若;张丽;张雷;王家鑫;
• 机 构: 河北农业大学动物科技学院动物免疫学实验室 保定 071000
• 出 处: 2008年京津冀畜牧兽医科技创新交流会暨新思想、新观点、新方法论坛
• 发表日期: 2008年期

目的:探讨在体外条件下负载灭活口蹄疫病毒(FMDV)树突状细胞活化CD+8T细胞的机制。方法:用重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和白介素-4(rmIL-4)将小鼠外周血单核细胞诱导分化成树突状细胞(MoDCs),以信号阻断法从淋巴结T细胞制备CD+8T细胞,利用负载FMDV的MoDCs与CD+8T细胞共培养,以FMDV+MoDCs+淋巴结T细胞作为对照,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。用蛋白酶体抑制剂和溶酶体抑制剂处理MoDCs,2h后再负载灭活FMDV,并与CD+8T细胞共培养,用FMDV+MoDCs+CD+8T细胞和FMDV+MoDCs作对照,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。结果:在共培养9h,CD+8T细胞的IFN-γ释放量约为淋巴结T细胞,IFN-γ释放量的1/6,随后,淋巴结T细胞和CD+8T细胞均产生少量IFN-γ。在FMDV+MoDCs+CD+8T细胞对照组,在共培养至9h-24h,CD+8T细胞释放IFN-γ的量逐渐增多。灭活FMDV负载被lactacystin和氯喹处理的MoDCs(iMoDCs)与CD+8T细胞共培养后9h-12h,CD+8T细胞产生IFN-γ显著减少,共培养至24h,IFN-γ释放显著增多,在36h,CD+8T细胞产生的IFN-γ水平升至最高,与对照组相比有显著的统计学意义。结论:负载灭活FMDV的MoDCs可以活化淋巴结T细胞,并以活化CD+4T细胞为主。而且,负载灭活FMDV的MoDCs既可以交叉提呈途径活化CD+8T细胞,还可通过非MHC-Ⅰ和非MHC-Ⅱ类分子依赖途径激活CD+8T细胞。该发现为研制口蹄疫新型治疗性疫苗开辟了一条新途径。