纳米丝素蛋白为支架重建组织工程角膜的初步研究

• 作 者: 王丽强[1]郭慧玲[1]杜改萍[1]马瑞珏[1]DavidKaplan[2]董莹[1]黄一飞[1]
• 机 构: 解放军总医院眼科,北京,100853
• 出 处: 第十二届全国角膜及眼表疾病学术大会暨第四届全国角膜屈光手术大会
• 发表日期: 2012年期

　　目的：评价丝素蛋白作为组织工程角膜新型生物材料的可行性.方法：建立丝素蛋白植片家兔角膜内埋植模型,对植片在角膜内的情况做连续性观察.通过裂隙灯下观察,分别以角膜状态、新生血管、充血程度及分泌物作为评价指标,通过统计分析研究评价移植片对角膜的影响；通过Pentacam三维眼前节分析仪观察植片植入后对角膜厚度及形态的影响；不同时间点对家兔角膜进行取材,HE染色观察植片是否引起角膜的炎症反应及组织结构变化；免疫荧光染色检测角膜内I型胶原、Ⅲ型胶原及纤维连接蛋白.结果：术后2、4、7、14、 30、 90天用Pentacam三维眼前节分析仪检查,可见角膜形态良好,植片埋植于角膜基质层间.应用成组秩和检验(Mann-Whitney Test)比较实验组和对照组的角膜状态,局部充血,诱发角膜缘新生血管以及引起眼内分泌物情况结果,显示各时间点二组差异均无统计学意义(P＞0.05).HE染色丝素膜植入后胶原排列情况与正常角膜基本无差别,植片与周围组织贴合良好,7d有轻微炎性反应,植片层间少量白细胞聚集,1m后炎症反应消失与对照组无区别.I型胶原蛋白表达结果,1m后植片周围开始有I型胶原蛋白生成,排列规整.6m实验组植片与周围组织贴合处布满高荧光表达,I型胶原蛋白大量生成.Ⅲ型胶原蛋白结果,7d实验组染色呈线形高荧光, 1m后高荧光区域较7d实验组有所扩大.3m数量及范围均较1m实验组减少.6m后Ⅲ型胶原蛋白荧光较弱.纤维连接蛋白表达结果,实验组7d与植片贴合处角膜基质层出现连续线形阳性荧光表达.1m荧光强度及范围均较7d标本大幅增高,3m后荧光强度及范围与1m标本相较无明显差别,6m虽较3m范围扩大但数量减低.结论：初步试验表明,纳米丝素蛋白因为其良好的生物相容性以及促进细胞外基质分泌的特点,是组织工程角膜材料的可选材料.