蚓激酶基因乳腺表达载体构建及牛乳腺瞬时表达

来源 :第十三次全国动物遗传育种学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:petry1989
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在稀有密码子的改造基础上,人工合成了849bp的蚓激酶F-Ⅲ-1全长cDNA序列,并以其为目的基因,构建了以山羊β-酪蛋白启动子为上游调控序列的乳腺组织特异性表达载体pBLK和pLN-bCP-LK.两种质粒分别以200μg、500μg、1000μg、2000μg的剂量梯度注入泌乳期黑白花奶牛乳腺,以纤维蛋白平板溶圈法(FAPA)检测该基因表达后奶样纤溶活性.结果表明,注射后3~78h,奶样有明显纤溶活性,其中6~16h活性最高.SPSS10.0分析结果表明,pBLK质粒的500μg与其他三个剂量溶圈直径之间差异显著,而其他三个剂量之间差异不显著;pLN-bCP-LK质粒的各剂量溶圈直径之间差异均不显著,且两种质粒的同剂量溶圈直径之间差异也不显著.以上结果表明,改造后的蚓激酶基因可以在泌乳期黑白花奶牛乳腺中实现瞬时表达,以500μg的注射剂量表达效果最佳.
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