论文部分内容阅读
研究背景与目的:类风湿关节炎(RA)是以多发性、非特异慢滑膜炎症为主要表现的全身性疾病.成纤维样滑膜细胞(FLS)是滑膜组织最活跃的组成细胞,可产生大量炎性因子.过氧化物酶体增殖活化受体（PPAR）γ在炎症和免疫反应中发挥着重要作用，且ERK信号转导通路与与炎症反应的调控密切相关。本研究拟探讨PPARγ激动剂对RA-FLS表达炎症因子及MMP-3的影响及其与ERK信号通路的关系。
方法：细针活检获取确诊活动期RA患者的滑膜组织，体外分离培养FLS，分别用不同浓度的PPARγ激动剂15d-PGJ2（0，3，6，9μM）和ERK抑制剂U0126(0,10,25,50μM)干预RA-FLS，48h后CBA检测法和ELISA法分别检测细胞上清炎症因子、MMP-3蛋白水平的变化。再进一步用6μM的15d-PGJ2干预RA-FLS，分别于0min、15min、30min、60min、120min、24h、48h后Western blot检测ERK磷酸化水平的变化。
结果：①15d-PGJ2干预RA-FLS 48h后，IL-6和IL-8蛋白表达降低，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05），且随15d-PGJ2浓度增高，IL-6、IL-8蛋白表达降低越明显，呈剂量依赖性（P<0.05）；与对照组比较，3μM浓度的15d-PGJ2对MMP-3的表达无明显抑制作用，而6μM、9μM浓度的15d-PGJ2对MMP-3表达有明显抑制作用（P<0.05），但两个浓度组之间的差异无统计学意义；②ERK抑制剂U0126(0,10,25,50μM)干预RA-FLS 48h后，IL-6、IL-8和MMP-3蛋白表达水平及 ERK 磷酸化水平均明显下调（P<0.05），但不同浓度组之间的差异无统计学意义；③6μM浓度的15d-PGJ2干预RA-FLS后15min、30min、60min、120min后，ERK磷酸化水平较0min时无明显下调；干预24h、48h后ERK磷酸化水平明显下调，较0min时比较差异有统计学意义（P<0.05），但无时间依赖性。
结论：PPARγ激动剂可能通过ERK通路抑制RA-FLS内IL-6,IL-8和MMP-3的表达，这为缓解RA滑膜炎症提供了新的研究思路。