【摘 要】
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糖蛋白是一类重要的翻译后修饰蛋白,在生物体内种类繁多,分布广泛,与人体中很多重要的生物学过程密切相关[1,2].因此,对糖蛋白的研究具有十分重要的生物学意义和临床应用价值.通常糖蛋白在复杂生物体系中的绝对丰度都非常低,高丰度非糖蛋白的存在会对低丰度的糖蛋白产生干扰和掩盖.为了获得糖蛋白的质谱图谱,需要对糖蛋白或糖肽进行分离富集[3,4].近几年来,硼酸亲和技术在糖蛋白分离富集领域得到了快速的发展.
【机 构】
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南开大学化学学院分析科学研究中心,天津市南开区卫津路94号,300071 南开大学化学学院分析科学
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糖蛋白是一类重要的翻译后修饰蛋白,在生物体内种类繁多,分布广泛,与人体中很多重要的生物学过程密切相关[1,2].因此,对糖蛋白的研究具有十分重要的生物学意义和临床应用价值.通常糖蛋白在复杂生物体系中的绝对丰度都非常低,高丰度非糖蛋白的存在会对低丰度的糖蛋白产生干扰和掩盖.为了获得糖蛋白的质谱图谱,需要对糖蛋白或糖肽进行分离富集[3,4].近几年来,硼酸亲和技术在糖蛋白分离富集领域得到了快速的发展.硼酸亲和作用的机理是,硼酸基团在碱性条件下与带有顺式二醇(cis-diol)基团的物质共价结合,形成稳定的五或六元环酯结构,当介质的pH切换为酸性时则可实现可逆的解离.因此硼酸亲和技术发展成为一种选择性富集含顺式二醇基团化合物的有效提纯手段.提高硼酸修饰在固相载体(如磁性Fe3O4)上效率,将有助于提升糖蛋白分析的灵敏度.Cu(I)催化叠氮-炔基环加成反应(CuAAC)和巯基-烯(thiol-ene)反应是典型的点击化学反应.具有反应条件简单(对水、氧气不敏感)；产率高、纯化简单,具有立体选择性,目前已应用于材料科学、表面修饰、色谱固定相制备等领域[5,6].
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