【摘 要】
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目的：探讨S100A8对化疗诱导的白血病细胞自噬的调控,以阐明其通过自噬抑制凋亡,提高白血病细胞对化疗药物抵抗的作用机制. 方法：检测不同白血病细胞内S100A8mRNA和蛋白的表
【机 构】
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中南大学湘雅医院儿科 长沙,410008
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目的：探讨S100A8对化疗诱导的白血病细胞自噬的调控,以阐明其通过自噬抑制凋亡,提高白血病细胞对化疗药物抵抗的作用机制.
方法：检测不同白血病细胞内S100A8mRNA和蛋白的表达情况,四甲基偶氮唑蓝(methylthiazolyltertrazolium,MTT)法检测细胞存活率,并获得相应药物的半数抑菌浓度(IC50).以K562及MV4-11细胞为研究对象,通过基因转染、RNA干扰技术、药物阻断等上调或抑制S100A8及相关通路信号蛋白的表达,通过western blotting、免疫共沉淀等方法：检测白血病细胞S100A8、ULK1、BECN1,PI3KC3、ATG7及自噬相关标志蛋白的变化和蛋白间的相互作用,透射电镜观察细胞自噬小体的变化;通过流式细胞术检测细胞凋亡率.
结果：耐药细胞系(K562/A02,HL60/ADR)的S100A8蛋白及mRNA表达水平均高于其相应非耐药细胞系(K562,HL60);而不同的细胞系间(K562.Jurkat及MV4-11)，对同一药物的耐药性越高，S100A8的表达也越高;表明白血病细胞的耐药性增加与S100A8的表达呈正相关。K562、HL60、Jurkat及MV4-11细胞分别加入ADR,VCR作用48h后，相应细胞系S100A8的mRNA及蛋白的表达水平均明显增加，证实白血病细胞在受到化疗药物刺激时S100A8的表达会增高。
结论:S100A8是化疗诱导的白血病细胞自噬的重要调节因子，并由此参与了白血病细胞对化疗药物抵抗的调控，为白血病的靶向治疗提高了新的思路。
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