【摘 要】
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桧状青霉(Pencillium piceum )是本课题组经多轮理化诱变得到的一株高产纤维素酶突变株.利用葡聚糖凝胶柱层析从桧状青霉的胞外蛋白中分离纯化到一个20kDa的小分子蛋白.
【机 构】
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天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,中国科学院天津工业生物技术研究所
【出 处】
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第七届中国工业生物技术发展高峰论坛
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桧状青霉(Pencillium piceum )是本课题组经多轮理化诱变得到的一株高产纤维素酶突变株.利用葡聚糖凝胶柱层析从桧状青霉的胞外蛋白中分离纯化到一个20kDa的小分子蛋白.以pNPC,CMC,水杨苷,木聚糖,微晶纤维素为底物,该蛋白都没有检测到酶活力.当玉米芯粉为底物,该蛋白以微量蛋白浓度与里氏木霉(T.reesei ),桧状青霉(P.piceum )粗酶液进行协同实验时发现,里氏木霉和桧状青霉的水解效率分别提高了20％ 和33％.为了分析该蛋白的协同作用机理,用该蛋白单独处理不同组成的木质纤维素材料(浒苔,玉米芯,巨藻),通过FTIR,XRD,NMR分析木质纤维素处理前后结构上的差异.研究结果发现,该蛋白处理木质纤维素后,木素结构中的愈创木酚基、紫丁香基,纤维素的结晶结构和氢键网络结构都遭到了破坏.对该蛋白水解木质纤维素后的生成产物分析时发现,有自由基的产生,并且伴有少量D-葡萄糖和D-山梨醇的产生.我们推测该蛋白具有氧化性,可以氧化纤维素链末端的醛基,产生自由基.一方面自由基作用位点具有广泛性,可以随机地破坏木质纤维素内部的β-1,4 糖苷键,破坏纤维素、半纤维素和木素结构,生成D-葡萄糖.
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