【摘 要】
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目的:前期研究工作表明,miR-23a在喉癌组织中高表达,具有降低喉癌细胞的凋亡能力和增加喉癌细胞的侵袭能力,提示其可能发挥潜在癌基因的功能.本研究拟初步探讨miR-23a在喉癌
【机 构】
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中国医科大学医学遗传学教研室,沈阳110001
【出 处】
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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会
论文部分内容阅读
目的:前期研究工作表明,miR-23a在喉癌组织中高表达,具有降低喉癌细胞的凋亡能力和增加喉癌细胞的侵袭能力,提示其可能发挥潜在癌基因的功能.本研究拟初步探讨miR-23a在喉癌中的作用机制.方法:通过TargetScan等靶基因预测软件预测miR-23a的靶基因;应用实时荧光定量RT-qPCR和Western blot方法检测喉癌患者癌组织和癌旁组织中APAF-1的RNA和蛋白表达水平并与相应喉癌组织的miR-23a表达水平做相关分析;miR-23a转染Hep2细胞后,应用实时荧光定量RT-qPCR和Western blot方法检测APAF-1的表达水平;构建荧光素酶报告基因-APAF-1 3UTR表达载体,与miR-23a共转染Hep2细胞,检测荧光素酶报告基因活性.结果:生物信息学预测结果显示APAF-1可能是miR-23a的潜在靶基因;RT-qPCR和Western blot检测结果表明喉癌患者癌组织中APAF-1RNA和蛋白表达水平均显著低于癌旁组织中,且相应组织中APAF-1与miR-23a的表达水平呈负相关关系;过表达miR-23a可以显著下调APAF-1表达水平(P≤0.05);荧光素酶报告基因检测结果发现miR-23a与APAF-1的3UTR直接结合(P≤0.05),证明APAF-1为miR-23a靶基因.结论:miR-23a靶向APAF-1参与喉癌的发生。
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