【摘 要】
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为了明确harpins蛋白在植物上的作用位点及受体分子,利用水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)harpin蛋白HpalxooN端N21多肽能形成卷曲螺旋( Coiled-coil,C
【机 构】
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扬州大学园艺与植物保护学院,扬州 225009
【出 处】
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中国植物保护学会2014年学术年会
论文部分内容阅读
为了明确harpins蛋白在植物上的作用位点及受体分子,利用水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)harpin蛋白HpalxooN端N21多肽能形成卷曲螺旋( Coiled-coil,CC)结构的特性,采用亲和层析(Affinity Chromatography,AC)的方法从烟草(Nicotiana tabacum L.“Xanthi”)中筛选与其结构互作的受体分子.以溴化氰活化的高流速4B琼脂糖微球(CNBr Bio-sep 4FF)为载体,以化学合成的Hpalxoo-N21多肽为配基的AC柱,经烟草质外体液蛋白浓缩液上样,用非特异性洗脱液(0.1mol/L NaCl,0.2mol/L NaHC03,pH9.0)洗脱获得一条单一的SDS-PAGE条带,经MALDI-TOF MS检测及GenBank中blastp比对鉴定为光系统Ⅱ放氧相关23 kDa蛋白.对MALDI-TOF MS分析得到的氨基酸序列用Biogem平台的在线软件S2Spred(http：//www.biogem.org/tool/S2Spred/)进行二级结构预测,结果表明,在多个区域能形成α-螺旋结构,用COILS( http：//www.ch.embnet.org/software/COILS_form.html)在线程式进一步预测CC形成区域,结果显示在35 -55位能形成CC结构.根据CC互作的原理,该蛋白的这段区域可能以CC方式与N21多肽进行互作.
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