【摘 要】
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本文通过提取的鸡嚎组织总RNA经1%的琼脂糖凝胶电泳检测,可见总RNA 28 S和18S两条带整齐清晰、完整性好,且没有DNA污染条带及降解条带。经紫外分光光度计检测,OD260nm /OD280nm值均在1.8-2.1之间,说明无蛋白质和DNA以及其它杂质污染,RNA纯度高。利用常规PCR对6个基因及p-actin基因进行扩增,目的片段大小与预期结果相符。标准曲线的相关系数均在0.994以上,扩
【机 构】
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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;扬州大学动物科学与技术学院,江苏扬州 225009
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本文通过提取的鸡嚎组织总RNA经1%的琼脂糖凝胶电泳检测,可见总RNA 28 S和18S两条带整齐清晰、完整性好,且没有DNA污染条带及降解条带。经紫外分光光度计检测,OD260nm /OD280nm值均在1.8-2.1之间,说明无蛋白质和DNA以及其它杂质污染,RNA纯度高。利用常规PCR对6个基因及p-actin基因进行扩增,目的片段大小与预期结果相符。标准曲线的相关系数均在0.994以上,扩增效率在0.9-1.1之间,定量结果准确可靠。7对引物在荧光定量PCR仪中的扩增效果良好,只有1个特异峰,为特异性产物,无引物二聚体及非特异性产物的形成。6个候选基因在畸形和正常鸡嚎组织中的相对表达量结果显示,BMP4,Claw keratin-like和LPL3个基因在畸形嚎中的表达量显均著高于正常嚎(P<0.05) ; CK19,ALDH7A1和GLA3个基因在正常嚎中的表达量均显著高于畸形嚎。6个基因在畸形与正常鸡嚎组织中的表达量存在差异,且表达调控方向与前期DGE试验表现一致,说明前期筛选的结果具有较高的可靠性和准确性。同时,也进一步说明候选基因可能对北京油鸡嚎畸形性状有一定的调控作用,但主要调控机理还需要进一步研究与探索。
其他文献
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本研究通过对PPARγ基因启动子区翻译起始位点上游一段长度为875bp(-1085-211)的序列进行甲基化分析,结果表明:该区域一共包括6个CpG位点,分别位于翻译起始位点上游一927,-709,-537,-460,-348和一296bp处。在高、低脂系肉鸡中,该区域DNA甲基化总体水平随着周龄增加而下降,并且三个周龄低脂系肉鸡的甲基化水平均显著高于高脂系肉鸡(P<0.05 )。其中一460,-
本文以黑羽番鸭为素材,进行试验研究,在7对引物的检测结果中发现2对引物(暂命名为引物3、引物7)的扩增片段中存在多态。引物3扩增产物检测显示3种基因型,分别定义为EE,FF,EF,序列比较发现在第3内含子第4位点存在A-G突变。FF型基因型频率最高为0.3818 , EF型次之为0.3455 , EE型最低为0.27270F等位基因频率比E等位基因频率高0.1090。引物7扩增产物检测显示3种基因
本文通过对朗德鹅的试验研究,扩增获得的HNF4α基因序列包括完整的1371bpCDS区,与人、大鼠、小鼠、猪、牛、绵羊和原鸡的同源性分别为:79.14%-95.09%0HNF4α基因共编码456个氨基酸,为亲水性蛋白,二级结构分析其具有a螺旋(197个AA ,43.20%)、延长片段(35个AA,7.68%)和无规卷曲(224个AA,49.12%)三种结构,存在26个磷酸化位点,分别在Ser(15
本文通过对大余麻鸭的试验研究,除体重外各体尺指标的变异系数均小于10%,由此可见各指标的变异系数均较小说明数据的精确性是合格的。大余麻鸭的体重、体尺有较大的变异,表明遗传物质丰富,有利于品种或品系选育与利用工作的进行。
本文通过对地方鹅品种的试验研究,结果显示,在10个座位上共检测到89个等位基因;群体的平均He为0.5785±0.012,平均PIC值为0.5949,其中马岗鹅遗传变异最高。群体间存在着极显著的遗传分化,群体间遗传分化系数为0.112(P<0.001),并且所有座位都显著地贡献于这一结果(P<0.001)。Ds遗传距离为0.04540.2342,Nm变异为0.74045.3806。亲缘关系分析显示
通过对朗德鹅肝脏小RNA进行二代测序,获得鹅肝脏中高表达的miR-122。运用探针法进行miR-122定量,结果显示填饲组鹅肝脏的miR-122表达量呈下降趋势。提示miR-122可能在鹅肥肝形成过程中发挥了重要作用。参考鸡基因组信息以及本实验室前期转录组结果预测并筛选出P4HA1,TGFB3,ALDOB,FADS2,FABP5,PKM2,FASN和ACOXl/l个靶基因。利用双荧光素酶系统在CH
本文以黑羽番鸭为素材,填饲结束后屠宰测定番鸭产肝性能,结果公番鸭平均肝重为350.06g,母番鸭平均肝重为216.58g,公母番鸭在肝重上差异极显著(P<0.01),公母番鸭在肝体比方面差异不显著(P>0.05);填饲后公母番鸭在活重、屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重和腿肌重方面表现差异极显著(P<0.01),在腹脂重上表现差异显著(P<0.05),在腹脂百分率方面呈现差异不显著。公番鸭肝重与体
本文通过对鸡的试验研究,结果表明(1)同一时期的鸡生殖细胞用二酶二步(胶原酶I、胰酶)消化法分离提取细胞的效果显著优于胶原酶I或胰酶,且二酶二步(胶原酶I、胰酶)消化法分离获得的鸡生殖细胞的细胞活率在95%左右。(2)不同时期的鸡生殖细胞,孵化15d的分离效果显著优于孵化20d和出壳8d的。(3)生殖细胞在缺乏支持细胞作为饲养层的情况下不易贴壁,且即使贴壁其在体外存活的时间也很短;有支持细胞贴壁生