【摘 要】
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采用草菇内源启动子gpd-Vvs与多功能纤维素酶基因mfc连接构建了表达载体pgVvs-mfc；采用PEG介导的原生质体法把表达载体pgVvs-mfc和pvg-afp(含草菇gpd-Vvs启动子和afp基因)共转
【机 构】
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华南农业大学食品学院,生物工程系华南农业大学食品学院,生物工程系;华南农业大学生物质能研究所,广州,510640
【出 处】
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第二届全国食用菌中青年专家学术交流会
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采用草菇内源启动子gpd-Vvs与多功能纤维素酶基因mfc连接构建了表达载体pgVvs-mfc；采用PEG介导的原生质体法把表达载体pgVvs-mfc和pvg-afp(含草菇gpd-Vvs启动子和afp基因)共转化进草菇菌丝原生质体,通过O℃低温筛选获得拟转化子,拟转化子经过PCR鉴定及Southem杂交验证结果表明4个转化子(TV-m2、TV-m4、TV-m6和TV-m7)的基因组中整合了咖基因；4个转基因菌株的CMC酶活性和滤纸酶活性测定的结果表明了转基因草菇的酶活性比对照的酶活均有显著性提高,其中CMC酶活力最高的是TV-m2和TV-m6为4.60U/mL,是对照的1.65倍；滤纸酶活最高的也是TV-m2为4.74 U/mL,是对照的1.76倍.出菇实验结果表明了这4个转基因菌株的生物转化率(分别为17.8％、19.3％、16％和22％)均显著高于均比对照(12％).
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