海产品中副溶血弧菌巢式PCR检测方法的建立

来源 :中国食品科学技术学会第十一届年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cherrydarling
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  副溶血弧菌是一种世界范围性的食源性致病菌,食用了该菌污染的海产品可导致胃肠炎.为了建立一种可快速、特异地检测海产品中副溶血弧菌的方法,比较了所有弧菌的基因组序列,筛选了一个特异性的标记基因—VP1331.根据该基因建立了副溶血弧菌的巢式PCR检测方法,并评估了其特异性、敏感性和稳定性.结果表明,只有在以副溶血弧菌基因组DNA为模板时才能扩增出目的片段,而其他11种弧菌和非弧菌均不能扩增出目的片段.该方法的检测限为基因组DNA10fg、纯培养物6.6 CFU.人工污染实验表明,初始菌液浓度为25.7 CFU/100 mL时只经过2h的培养即可检出.上述结果表明,VP1331基因可以作为副溶血弧菌种特异性标记,本巢式PCR方法可用于污染海产品中该菌的检测与鉴定.
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