黄曲霉碳源代谢抑制途径中creA基因相关功能研究

来源 :第九届中国模式真菌研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wlhkbbc
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  许多丝状真菌已经进化出一种主要是腐生的生活方式,这种生活方式能够确保其在与其他微生物竞争有限资源中成功胜出,是其在环境中生存的关键.这种广泛调解机制就是碳源代谢抑制(CCR):它能确保营养价值高于其他的碳源的优先同化.在丝状真菌构巢曲霉中,已经发现有三个基因,creA,creB,creC和creD参与CCR途径,CreA已经被证明可以作为抑制因子调解CCR.黄曲霉菌(Aspergillus flavus)是一种常见腐生性植物病原菌,同时也是致免疫功能缺陷动物曲霉病重要病原菌.本次研究我们采用同源重组的方法,构建了敲除黄曲霉组creA突变体ΔaflcreA,结果表明黄曲霉creA对生长发育、次级代谢,侵染能力均有重要影响.在含葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的MM培养基上,敲除creA导致黄曲霉在含葡萄糖的培养基上的生长速率比其他两种快,而且黄曲霉菌毒素的生物合成量也多于另外两种.在含葡萄糖的MM上,ΔAflcreA突变体无性孢子的合成量也多于其他两种培养基;并且敲除ΔcreA影响了分生孢子梗的合成;同时也影响了黄曲霉菌菌核的合成.侵染实验测定结果表明 ΔAflcreA菌株导致侵染玉米能力显著下降,黄曲霉毒素合成量明显下降.亚细胞定位结果表明,在葡萄糖存在下,CreA主要定位在细胞核中.当碳源换成其他非优势碳源,例如乳糖,CreA在细胞核中的量减少.综上,本次研究我们阐明了碳源代谢抑制途径中creA在黄曲霉生长发育与次级代谢调控的重要作用,目前,在酿酒酵母及丝状真菌构巢曲霉,里氏木霉等中CCR都有所研究,但大多都是用于工业上生产α-淀粉酶,β-半乳糖苷酶等各种酶制剂,至于其产毒机制尚不是很清楚,而且对于如何控制丝状真菌毒素的污染也没有提出可行性办法.本次研究为未来基因手段防控黄曲霉菌的污染提供一种重要可能的靶标,并奠定重要理论基础.
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