【摘 要】
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[目的]：安普霉素(Apramycin)又名阿普拉霉素,具有抗菌谱广,不易产生耐药性等优点,广泛应用于养殖业中.但是兽药滥用现象日益严重,因而建立该类药物在食源性组织中的残留检
【机 构】
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中国农业大学动物医学院,北京100193
【出 处】
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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会
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[目的]：安普霉素(Apramycin)又名阿普拉霉素,具有抗菌谱广,不易产生耐药性等优点,广泛应用于养殖业中.但是兽药滥用现象日益严重,因而建立该类药物在食源性组织中的残留检测方法尤为重要.本实验旨在合成HRP酶安普霉素,建立直接竞争ELISAs方法,快速检测安普霉素.[方法]：1.酶标抗原制备：高碘酸钠溶液与HRP酶溶液混匀,4℃放置30m in；加入乙醇溶液室温反应30 min；加入安普霉素室温反应3h；加入硼氢化钠溶液室温反应2 h；1×PBS中透析.2.酶标抗原生物活性鉴定：安普霉素单克隆抗体10万倍稀释,4℃过夜包被,封闭1小时；酶标抗原1万倍稀释,37℃反应30 min；室温显色10 min,终止反应；450 nm处酶标仪读数.3.直接竞争ELISAs：抗体和酶标抗原按以上浓度稀释,安普霉素标准品与酶标抗原同时加入竞争抗体,具体步骤同上.[结果]：IC10=0.22 ppb,IC50=1.53 ppb,R2 =0.9998,线性范围为0.38-6.12 ppb.[结论]：本试验成功制备了安普霉素的酶标抗原,并用该酶标抗原建立了直接竞争ELISAs方法,实验结果表明该方法可用于实际样本的检测.
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