【摘 要】
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目的：将已构建完成的分泌型核心蛋白聚糖真核表达载体转染到HepG2细胞中并检测其表达同时研究其抗肿瘤作用的机制。 方法：脂质体介导核心蛋白聚糖真核表达载体转染HepG2细胞
【机 构】
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吉林大学中日联谊医院中心实验室,长春 130033
【出 处】
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第十二届中国体视学与图像分析学术会议
论文部分内容阅读
目的：将已构建完成的分泌型核心蛋白聚糖真核表达载体转染到HepG2细胞中并检测其表达同时研究其抗肿瘤作用的机制。
方法：脂质体介导核心蛋白聚糖真核表达载体转染HepG2细胞,经G418筛选建立稳定转染的细胞株,采用RT-PCR、免疫组化和westernblot方法检测其表达。MTT方法检测细胞生长情况,流式细胞仪分析细胞周期,RT-PCR和westernblot方法检测P21WAF1/CIP1 mRNA和蛋白质表达情况。
结果：与对照组比较,RT-PCR、免疫组化及west-ernblot方法可见转染组细胞DCNmRNA和蛋白表达明显增高;MTT检测发现转染组细胞生长缓慢,细胞周期检测发现转染组G0/G1期细胞显著增多,而s期细胞明显降低;RT-PCR和westernblot检测发现转染组细胞p21WAF1/CIP1 mRNA和蛋白质表达增高。
结论：本研究成功建立了稳定转染DCN的HepG2细胞株,并证实DCN能够抑制细胞生长、阻滞细胞周期以及提高P21WAF1/CIP1 mRNA和蛋白质的表达。
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