【摘 要】
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目的：通过免疫共沉淀结合质谱分析技术筛选与不育症患者血清中抗精子抗体结合的精子蛋白，从而进一步揭示抗精子抗体相关免疫性不育的机制.方法：首先利用ELISA 试剂盒进行抗精子抗体阳性血清的筛选，再采用混合抗球蛋白试验(MAR)对抗精子抗体阳性血清进行确认.收集正常人精液，提取精子膜蛋白，然后进行免疫共沉淀反应，分别将抗精子抗体阳性血清、抗精子抗体阴性血清与精子膜蛋白孵育后，同时加入protein A
【机 构】
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河北北方学院研究生部 解放军总医院临床检验科
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目的：通过免疫共沉淀结合质谱分析技术筛选与不育症患者血清中抗精子抗体结合的精子蛋白，从而进一步揭示抗精子抗体相关免疫性不育的机制.方法：首先利用ELISA 试剂盒进行抗精子抗体阳性血清的筛选，再采用混合抗球蛋白试验(MAR)对抗精子抗体阳性血清进行确认.收集正常人精液，提取精子膜蛋白，然后进行免疫共沉淀反应，分别将抗精子抗体阳性血清、抗精子抗体阴性血清与精子膜蛋白孵育后，同时加入protein A/G 孵育，利用SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)对免疫沉淀复合物进行分离，切胶酶解后，进行液相色谱结合二级质谱(LC-MS/MS)分析，得到相应的蛋白质ID.通过搜索UniProt 数据库检索查找这些蛋白的名称、生物学功能、细胞定位等信息.
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