【摘 要】
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传统的指数式富集配体系统进化(SELEX)方法筛选核酸适配体存在时间周期长、易失败、产物效果不佳等方面存在的缺陷。造成这些缺陷的根本原因是在原理上SELEX方法依赖溶液
【机 构】
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合肥工业大学(AptitudeMedicalSystems)UnitedStates(StanfordUniversity)UnitedStates
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传统的指数式富集配体系统进化(SELEX)方法筛选核酸适配体存在时间周期长、易失败、产物效果不佳等方面存在的缺陷。造成这些缺陷的根本原因是在原理上SELEX方法依赖溶液中化学平衡态下的主体分离,因此在一轮筛选过程中不能有效的将优良的备选核酸适配体序列从背景核酸序列库中区分开来。针对这一问题,我们以磁珠展示(particle display)方法为基础,首先利用乳化液聚合酶链反应(emulsion PCR)技术将核酸文库转换为磁珠文库;接着利用流式细胞筛选(Fluorescence Activated Cell Sorting,FACS)技术定量测定每个磁珠上核酸序列与目标底物的亲和力,将表面载有高度亲和力的核酸适配体序列的磁珠逐一主动分离出来,从而实现备选核酸适配体序列的高效富集。
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